主营产品:
动物实验动物实验外包科研实验外包上海动物实验水迷宫实验外包动物实验外包公司动物造模动物模型构建动物行为学实验细胞实验细胞实验外包细胞培养实验细胞周期实验细胞增殖检测细胞凋亡检测
产品与服务

上海达为科生物科技有限公司

电话:021-55130726

传真:021-55130728

联系人:张艳

电话:18017844061

邮箱:jierdun@jrdbio.com

地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室  



详细内容

IHC/ICC 常见问题分析

1. 无染色

脱蜡不彻底:延长脱蜡时间,更换二甲苯。

固定步骤(使用福尔马林和多聚甲醛固定剂)修饰了抗体识别表位:抗原修复法暴露出抗原表位,缩短固定时间

蛋白位于细胞核内(核蛋白),抗体不能穿透核膜:在封闭液和抗体稀释液中加入通透剂

④PBS缓冲液被细菌污染后破坏了靶蛋白的磷酸根:在抗体PBS储存液中加入0.01%叠氮化合物,或使用新鲜无菌的PBS

由于不当储存、稀释或反复冻融造成一抗/二抗试剂盒失效:做阳性对照确认一抗/二抗试剂盒的有效性

2. 高背景

没有封闭非特异性结合或封闭不充分:延长封闭时间,并考虑改换封闭剂

一抗浓度过高:滴定法寻找到适宜抗体浓度,或在浓度较低抗体中延长孵育时间(建议是缓慢而准确地结合)

存在内源性过氧化物酶活性:用酶抑制剂如抑制碱性磷酸酶的盐酸左旋咪唑(2mM),或抑制过氧化物酶的H2O2(0.3% v/v)。

固定过度(固定剂用福尔马林和多聚甲醛)导致抗体识别抗原位点被修饰:改变抗原修复方法,缩短与抗原修复液的孵育时间。

通透作用破坏膜并除去了膜蛋白:去除缓冲液中的通透剂

组织冲洗不彻底,有固定剂残留:所有步骤都要用PBS充分洗涤


 

Copyright@ 2003-2018  上海达为科生物科技有限公司 全迅彩票mogiso.com版权所有      电话:0756-2183150 传真: 地址: 邮编:
         沪ICP备15041491号-1     

沪公网安备 31011302004470号

友情链接:东方彩票  58彩票官网  东方彩票  金砖彩票注册  大金彩票注册  58彩票  必发彩票注册  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!